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陕西依科生物技术服务有限公司首页 > 实验问题解答 > 实验服务---甘肃石蜡包埋切片
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组织包埋是将客户组织标本通过固定,取材,脱水等过程后,用石蜡作为包埋剂,将组织标本包埋在石蜡中。
一,组织石蜡包埋切片实验步骤
1、取材:新鲜组织固定于甘肃4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精2h-85%酒精1.5h-90%酒精1.5h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-二甲苯I 30min-二甲苯II 30min-蜡I 1h-蜡II 1h-蜡III 1h。
3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4、切片:将修整好的蜡块置于甘肃石蜡切片机上切片,片厚4μm(不同组织略有调整)。 切片漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃ 烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
二,实验注意事项
1、固定液应有足够的量,一般为组织块体积的10∽15倍,不能贴壁,防止组织未固定好。
2、根据组织的不同和实验目的的不同,选取不同的固定液。
3、固定时间依材料大小、固定液种类而异,可从1小时到几个小时,有时中间需要更新固定液。某些固定液对组织的硬化作用较强,作用时间应严加控制,不能过长。
4、取材切面要平整,厚度不宜超过2mm,否则脱水效果不好。
5、对于有特殊要求的组织,取材时要提前对目的部位的预留。

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